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        結晶紫染色液

        簡要描述:

        革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師Gram創立。未經染色之細菌,由于其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征,而用以分類鑒定。革蘭氏染色屬復染法。

        更新時間:2019-03-30

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        革蘭染色液使用說明書

        【產品名稱】通用名稱:革蘭染色液

                    產品型號:JRBGL4S

        【包裝規格】每種染色液的包裝規格為每瓶50 ml、100ml、250ml500ml,整組染色液的包裝規格為:4×50ml、4×100ml、4×250ml4×500ml。

        【預期用途】用于細菌或真菌的涂片染色。

        【檢測原理】革蘭陽性菌的細胞壁有一層比革蘭陰性菌厚的肽聚糖,能與結晶紫緊密結合,不容易被脫色液洗掉,在此基礎上形成了革蘭染色液試劑。

        【主要成成

        主要

        主要成分

        規格

        數量

        50ml

        4×100ml

        4×250ml

        500ml

        結晶紫染色液(A液)

        結晶紫

        50ml/瓶

        100ml/瓶

        250ml/瓶

        500ml/瓶

        1瓶

        碘液(B液)

        碘、碘化鉀

        50ml/瓶

        100ml/瓶

        250ml/瓶

        500ml/瓶

        1瓶

        95%乙醇溶液(C液)

        乙醇

        50ml/瓶

        100ml/瓶

        250ml/瓶

        500ml/瓶

        1瓶

        番紅染色液(D液)

        番紅

        50ml/瓶

        100ml/瓶

        250ml/瓶

        500ml/瓶

        1瓶

         

        【儲存條件及有效期】

        1、原包裝未開封染色液的有效期為12個月,在有效期內的已開封染色液應在開封后6個月內使用完,每次用后應及時擰緊瓶蓋,以免揮發或變質。

        2、儲存條件:本試劑應貯存在相對濕度不大于80%,無腐蝕性氣體和通風良好的10℃~30℃常溫環境。

        3、生產日期和失效日期:詳見外包裝標簽。

        【樣本要求】待檢標本應為菌株或有菌株的標本。

        【檢驗方法】

        1.涂片

        取一潔凈載玻片,滴一小滴生理鹽水于玻片中央,按無菌操作要求,先用接種環,挑取少量某菌培養物于玻片中央水滴中,涂布均勻。要求涂片薄且均勻,使其自然干燥。

        2.固定

        菌液涂片干燥后通過火焰 1-2 次即可,不可過熱,以載玻片不燙手為宜。

        3.染色

        一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:

        1初染:滴加結晶紫染色液(A液)覆蓋玻片涂布區,染色1分鐘,水洗。

        2媒染:滴加(B液)碘液后染色1分鐘,水洗。

        3脫色:甩凈載玻片上水分,傾斜玻片,并襯以白紙,用95%乙醇溶液(C液)滴洗至無紫色褪下時為宜,時間20-60s。

        (4)復染:滴加蕃紅染色液(D液后,染色1-2分鐘,水洗。

        (5)吸干或在空氣中涼干后,油鏡鏡檢。

        【檢驗結果的解釋】在顯微鏡下觀察染色結果:

        1、在顯微鏡下觀察到紫色或深紫藍色菌落為革蘭染色陽性菌。  

        2、在顯微鏡下觀察到紅色或粉紅色菌落為革蘭染色陰性菌。 

        【檢驗方法的局限性】有些細菌有染色嗜變性,不一定完全是染色原因,應根據菌體形態加以確定。

        【注意事項】

        1、該染色液僅用于體外診斷。      

        2、涂片厚薄要均勻,自然干燥后再加熱固定。

        3、酒精脫色過度或復染的時間不能太長,陽性菌可被誤染為陰性菌;酒精脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。

        4、所用標本應視為具有傳染性物質。

        【參考文獻】

        1、陳天壽.《微生物培養基的制造與應用》.中國農業出版社.1995年版;

        2、王欽生等.《實用醫學培養基手冊》. 人民軍醫出版社.1999年版; 

        3、馬緒榮等.《藥品微生物學檢驗手冊》.科學出版社.2001年版。

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